Генетичне тестування деградованих ембріонів

Генетичне тестування деградованих ембріонів, FISH-метод дослідження нa 5 хромосом (13, 18, 21, X, Y) (включно 10 зразків). 

Генетичне тестування деградованих ембріонів, FISH-метод дослідження на 5 хромосом (13, 18, 21, X, Y) — це молекулярно-цитогенетичне дослідження, яке дозволяє провести визначення кількісних хромосомних аномалій,пов’язаних із найпоширенішими генетичними порушеннями, у клітинах ембріона, який зупинив свій розвиток (деградував).

Дослідження методом FISH є ефективним для визначення комплексних хромосомних аберацій та поліплоїдій, це характерна особливість даного типу передімплантаційного генетичного тестування. Метод FISH рекомендовано використовувати для генетичної діагностики ембріонів, що зупинились в розвитку. Отримана інформація допоможе зрозуміти потенційну причину зупинки розвитку та оптимізувати подальше лікування методами допоміжних репродуктивних технологій.

Тестування включає дослідження 5 хромосом для вивчення кількісних аномалій (змін у кількості) за хромосомами 13, 18, 21, Х та Y.

Показання до проведення дослідження Генетичне тестування деградованих ембріонів, FISH-метод дослідження на 5 хромосом (13, 18, 21, X, Y)

Виявлення під час лікування методами допоміжних репродуктивних технологій ембріонів, які припинили свій розвиток в процесі проведення культивування.

Чому може відбуватися зупинка розвитку (деградація) ембріонів?

• Наявність анеуплоїдій (зміна кількості хромосом), наприклад моносомії (відсутня одна хромосома), або трисомії (додаткова одна хромосома) за однією хромосомою.
• Наявність комплексних аберацій (додаткові, або відсутні кілька різних хромосом), поліплоїдій (збільшення або зменшення кількості досліджуваних хромосом), некоректний розподіл хромосом між клітинами.
• Вікові фактори,вік жінки старше 38 років. Зменшення якості яйцеклітин може свідчити про зниження загальної якості енергетичного комплексу яйцеклітин (мітохондрій). Знижена якість енергетичного комплексу, призводить до накопичення хромосомних змін, які можуть стати причиною деградації ембріонів.
• Високий рівень ДНК фрагментації сперматозоїдів. Під час культивування на 3-тю добу розвитку розпочинає функціонувати так званий ембріональний геном (до 3-ї доби розвитку залучена тільки материнська ДНК), отже можуть відбуватись порушення в функціонуванні генів, що призводить до зупинки росту та розвитку ембріона.

Переваги методу

Генетичне тестування деградованих ембріонів допоможе дізнатись чи справді причиною зупинки розвитку ембріонів є наявність хромосомних аномалій в досліджуваних клітинах.
Отримана інформація стане надійним джерелом для подальшої діагностики та формування індивідуального плану лікування спеціалістом репродуктологом.

Генетичне тестування деградованих ембріонів, FISH-метод дослідження на 5 хромосом рекомендовано пацієнтам, які потребують аналізу деградованих ембріонів, а саме визначення кількісних хромосомних аномалій (відхилень). Панель скринінгу на 5 хромосом включає вивчення анеуплоїдій за хромосомами 13, 18, 21, Х та Y.

Метод є ефективним для визначення комплексних хромосомних аберацій(порушення структури хромосом) та поліплоїдій (збільшення кількості всіх досліджуваних хромосом) ембріонів, що зупинилися в розвитку.

Підготовка та хід процедури

Для генетичного тестування деградованих ембріонів використовують дослідження методом FISH.

FISH (флуоресцентна гібридизація in situ) — це молекулярно-цитогенетичний метод, що допомагає виявляти конкретні послідовності ДНК в ядрах клітин за допомогою спеціальних реактивів (флуоресцентно відмічених зондів):

• фіксація клітин ембріона на предметному скельці.
• денатурація – розділення ланцюжків ДНК, під дією температури,проводиться для того, щоб флуоресцентний реагент зв’язався з досліджуваною ланкою ДНК
• гібридизація – взаємодія флуоресцентного реагента з ДНК ембріону, який тестується
• очищення зразку для видалення зайвих флуоресцентних реагентів, які не зв’язалися з ДНК
• вивчення результатів відбувається за допомогою флуоресцентного мікроскопа за допомогою використання збільшенні в 1000 разів. Фахівці цитогенетичної лабораторії перевіряють наявність “контрольних світлових сигналів”. В клітинах з нормальним генетичним набором буде зафіксовано зелене, блакитне чи помаранчеве свічення у відповідній кількості світлових сигналів.

Схема проведення дослідження методом FISH

Норма (2 помаранчевих сигнали та 2 зелених)(зображення у верхньому лівому куті)

Поліплоїдія (4 помаранчевих і 4 зелених сигнали) (зображення у нижньому правому куті)

Анеуплоїдія

Анеуплоїдія, не вистачає однієї 21 хромосоми