Преімплантаційна діагностика ембріона методом FISH

Fluorescence in situ hybridization (FISH) є одним з методів преімплантаційної генетичної діагностики (ПГД), яка проводиться в клініці «Айвімед» у рамках ЕКЗ. Флюоресцентна гібридизація in situ дозволяє відібрати для переноса в матку здорові ембріони без хромосомних патологій. Це підвищує ймовірність успіху програми ЕКЗ, знижує ризик спонтанних абортів і зменшує вірогідність народження хворої дитини.

ПГД за допомогою методу FISH підвищує:

• ймовірність відбору і перенесення в матку тільки здорових ембріонів (без хромосомних порушень);
• шанси на успішну імплантацію ембріона;
• перспективи благополучного народження дитини.

Знижує:

• ризик народження дитини з хромосомними захворюваннями;
• ймовірність невиношування вагітності;
• ризик мертвонародження або ранньої дитячої смертності.

FISH-діагностика поєднує в собі переваги цитологічних, цитогенетичних і новітніх молекулярних методів. Об’єктом дослідження є унікальні нуклеотидні послідовності конкретної хромосоми або її окремої ділянки.

Транслокації — найбільш часті структурні хромосомні перебудови, які фенотипічно не проявляються у носіїв. Транслокації можуть призводити до безпліддя, невиношування вагітності, мертвонародження або ранньої дитячої смертності, народження дітей з хромосомними аномаліями.

Як метод преімплантаційної генетичної діагностики FISH дозволяє визначати анеуплоїдії 13, 15-18, 21, 22 хромосом, а також X- і Y-хромосом і виявляти хромосомні перебудови.

У клініці «Айвімед» ПГД методом FISH виконується на 5 день розвитку ембріона, що дозволяє отримати більш точну та детальну інформацію щодо його хромосомного набору.

Переваги діагностики методом FISH на 5 день розвитку ембріона:

• досліджуються всі ембріони, які досягли стадії бластоцисти (тобто мають високий потенціал подальшого успішного розвитку);
• можливе вилучення більшої кількості клітин для дослідження (чим на 3 день розвитку) без шкоди для ембріона;
• низький ризик мозаїцизму ембріона (завдяки механізму самокорекції);
• високий коефіцієнт імплантації ембріонів.

Хто проходить FISH-діагностику

ПГД методом FISH проводиться в таких випадках:

• якщо вік майбутньої матері 35 років і старше;
• якщо вік майбутнього батька 42 роки і старше;
• у чоловіка виявлено порушення сперматогенезу;
• у жінки в анамнезі присутні 2 і більше невдалих спроб ЕКЗ або 2 і більше випадків невиношування вагітності.

Діагностика рекомендована при наявності у батьків рецесивного Х-зчепленого захворювання, в разі присутності делецій в Y-хромосомі.

Особливості ПГД методом FISH

• 97 % — достовірність результатів преімплантаційної генетичної діагностики;
• на 70 % — підвищується ймовірність успіху ЕКЗ з першої спроби;
• менше 0,5 % — ризик пошкодження ембріона під час біопсії трофектодерми;
• в 2 рази — нижчий ризик багатоплідної вагітності, невиношування вагітності;
• на 10 % — вище ймовірність успішної імплантації ембріона в матці;
• на 20 % — вище шанси на благополучне народження дитини.

Порядок виконання преімплантаційної діагностики методом FISH

1. Флюоресцентна гібридизація in situ дозволяє проводити гібридизацію як метафазних, так і інтерфазних хромосом за допомогою різних ДНК-зондів. Зонди є клонованими послідовностями або виділеними ділянками ДНК, які комплементарні ділянкам ДНК досліджуваного зразку. ДНК-зонди позначені флюоресцируючими речовинами.
2. Зразок для дослідження отримують на 5 день розвитку ембріона (стадія бластоцисти). Процедура називається біопсія трофектодерми і полягає в вилученні у ембріона декількох клітин зовнішнього шару (не зачіпається внутрішня клітинна маса, що являє собою основу для формування органів плода).

Лабораторний етап ПГД методом FISH включає в себе такі маніпуляції:

1. Для хромосоми (або її ділянки) готують зонд. Це однониткова ділянка ДНК, до якої прикріплюють флюоресцентні мітки.
2. За допомогою спеціального препарату денатурують ДНК, тобто розривають водневі зв’язки між подвійними нитками ДНК.
3. Обробляють зразок за допомогою ДНК-зондів. Нитки ДНК досліджуваного зразка і зонда комплементарні, тому зонд з’єднується з відповідною ділянкою хромосоми, і подвійна спіраль ДНК відновлюється (відбувається процес ренатурації).
4. Зразок обробляють хімічними сполуками, які вибірково приєднуються до флюоресцентних міток.
5. До отриманих комплексів додають флюоресцентні барвники.
6. Завдяки люмінесцентному мікроскопу можна побачити забарвлені і незабарвлені хромосоми.
7. Спеціаліст генетичної лабораторії аналізує отримані дані і складає висновок про наявність /відсутність хромосомних транслокацій і анеуплодій.
8. З віком людини в репродуктивних клітинах (яйцеклітинах і сперматозоїдах) відбуваються хромосомні порушення, які знижують шанси на вагітність, призводять до звичного невиношування або завмирання вагітності. ПГД методом FISH, яка може проводитися в рамках ЕКЗ, дозволяє відібрати для переносу в матку найбільш перспективні ембріони, щоб підвищити шанси на успішну імплантацію ембріона в матці, виношування і народження здорової дитини.
9. Щоб стати батьками довгоочікуваного здорового малюка, скористайтеся преімплантаційною генетичною діагностикою FISH в клініці «Айвімед».